加勒比在线视频,久久久久A V无码,爱爱欧美日,午夜无码日韩

<rt id="thtjv"><small id="thtjv"></small></rt>

  • <li id="thtjv"></li>
    咨詢熱線
    15800446246
    您的位置: 網(wǎng)站首頁 > 技術(shù)文章 > 不可避免,蛋白質(zhì)提取檢測試劑做定量測定

    不可避免,蛋白質(zhì)提取檢測試劑做定量測定

    發(fā)布日期: 2019-11-15
    瀏覽人氣: 2166
       蛋白質(zhì)提取檢測試劑適用于測定蛋白濃度在20-5000μg/ml樣品。測定前取1-2個樣做預(yù)實驗,若A測定管-A空白管﹥1.5,需將樣本用提取液稀釋后再測定,以確保測定的準確性。大部分蛋白質(zhì)都可溶于水、稀鹽、稀酸或堿溶液,少數(shù)與脂類結(jié)合的蛋白質(zhì)則溶于乙醇、丙酮、丁醇等有機溶劑中,因些,可采用不同溶劑提取分離和純化蛋白質(zhì)及酶。由于蛋白質(zhì)中存在著含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸,因此蛋白質(zhì)具有吸收紫外光的性質(zhì),大吸收峰在280nm波長處。在此波長范圍內(nèi),蛋白質(zhì)溶液的光密度OD280nm與其濃度呈正比關(guān)系,可作定量測定。
      自備實驗用品及儀器:
      臺式離心機、恒溫水浴鍋、可見分光光度計、移液器、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。試劑組成和配制:
      試劑A:液體50mL×1瓶,4℃保存。試劑B:液體1mL×1支,4℃保存。標準蛋白:液體2mL×1支,4℃保存。
      工作液配制:臨用前請根據(jù)擬用工作液體積(樣本數(shù)×1mL),將試劑A和B按照50:1的比例混合,蓋緊后充分混勻。樣品中可溶性蛋白質(zhì)提取:
      1.液體樣品:澄清無色液體樣品可以直接測定。2.組織樣品:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液(自備),根據(jù)需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水)冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清,即待測液。3.細菌、細胞:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。測定操作:
      1.分光光度計預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長到562?nm,蒸餾水調(diào)零。2.工作液置于60℃水浴預(yù)熱30min。